João de Castilho (em castelhano: Juan de Castillo; Merindade de Trasmiera, c. 1470 – c. 1552) foi um mestre de obras e arquiteto hispano-português originário da Cantábria (antigo Reino de Castela; atual Espanha), que desenvolveu a sua carreira da maturidade em Portugal, onde se fixou c. 1508. É considerado o maior arquiteto português do século XVI e um dos grandes da Europa do Renascimento.

Com formação goticista, a sua ação foi marcante no período manuelino, tendo depois um papel decisivo na afirmação do estilo renascentista em território português. João de Castilho foi um dos protagonistas maiores de uma decisiva viragem no sentido do classicismo. O seu percurso assinala ainda a promoção gradual da condição de mestre pedreiro (medieval) para a de arquiteto — no sentido moderno da palavra —, com o correspondente reconhecimento e ascensão a nível social.

João de Castilho foi um arquiteto e mestre de obras cuja atuação esteve ligada à construção de diversos monumentos históricos classificados pela UNESCO como Património Mundial. Entre eles estão o Mosteiro dos Jerónimos e o Convento de Cristo, além do Mosteiro de Alcobaça, do Mosteiro da Batalha e da fortaleza de Mazagão.